中央空調保養廠帶您了解冷凍保護劑
發布時間:2013年11月16日 點擊數:
中央空調保養廠帶您了解冷凍保護劑,Nakanishi以10二甲基亞砜為冷凍保護劑,并采用雙腔生物冷凍管緩慢降溫(降溫速率大約10CP分),-800e冰箱中保存氣管長達3個月仍保持一定的活性。而超過6個月的標本氣管結構嚴重破壞,移植后難以成活。因此,他認為使用雙腔生物冷凍管,-800e冰箱保存氣管的最長允許時間為3個月。
保存溫度高于-1300e會因細胞內重結晶導致細胞膜的破壞,而程控降溫可以更有效的控制降溫速度,因此Nakanish推測程控降溫,液氮保存氣管的時間應該更長。本實驗合用二甲基亞砜和海藻糖作為冷凍保護劑,程控降溫,液氮保存的氣管在8個月時仍保持了完整的結構,與冷凍1小時相比活性僅有微小的變化。
在另外的實驗中,抽沙管我們用該方法保存6周的氣管經同種異體移植后完全成活,與自體移植組無明顯差別。臨床應用時當然希望有活性氣管的保存時間越長越好,并且也需要明確這個最長的時限,因此這個期限將是我們下一步研究的課題。
冷凍速凍冷庫前將氣管標本在-40e冷凍保護劑中浸泡4小時,可以使冷凍保護劑充分浸潤氣管軟骨,提高其存活率。我們在實驗中也采用了Kawabe的方法。但冷凍保護劑均有一定的毒性,常溫接觸時間越長對細胞產生的毒害作用越大。在本實驗中雖沒有對此進行比較研究,但實驗結果顯示DTF組標本有相當的存活率,從而證明Kawabe的方法是有效和可行的。
DTF組標本在復溫后雖然有相當的存活率,但還是有個別軟骨細胞發生空泡變性。其原因究竟是是冷凍保護劑對細胞的毒性作用,還是冷凍保護劑沒有完全滲透入所有軟骨細胞,亦或是冷凍造成的損傷,有待進一步探討。
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